山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的表达及其多克隆抗体的制备和特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 江锦秀

作者： 江锦秀;张靖鹏;林裕胜;游伟;胡奇林

作者机构：

关键词： 山羊地方性鼻内肿瘤病毒;表面蛋白;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 福建农业学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 002 期

页码： 135-140

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】明确山羊地方性鼻内肿瘤病毒（ENTV-2）SU蛋白的功能。【方法】采用RT-PCR方法从ENTV-2FJ分离株中扩增获得SU基因片段,将其克隆到pMD-19T载体;测序验证后,再亚克隆到PET-32a（+）上,在RosettagamiB（DE3）感受态细胞进行表达,采用SDS-PAGE、Western-blot和ELISA对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。【结果】结果显示,表达的重组菌融合蛋白大小约64.38 kD,在IPTG终浓度0.4 mmol·L-1、 37℃诱导4 h表达效果最好。用纯化的ENTV-2进行SDS-PAGE,SU重组蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western-blot,结果显示鼠抗SU蛋白多克隆抗体能与ENTV-2抗原进行特异性的反应。【结论】表达的SU蛋白有较好的抗原性,为制备ENTV-2特异性单克隆抗体及建立ENTV-2特异性血清学方法奠定了基础。

分类号： S858.27

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