弓形虫RH株热应激蛋白40基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 路静

作者： 路静;张念章;田维鹏;殷铭阳;王瑞爱;周东辉;朱兴全;翁亚彪

作者机构：

关键词： 弓形虫;HSP40蛋白;克隆;原核表达;反应原性

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 01 期

页码： 73-77

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究弓形虫热应激蛋白40(TgHSP40)的生物学特性,采用RT-PCR方法从弓形虫RH株中扩增出TgHSP40基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化入表达菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。结果显示,重组菌可表达出分子质量约46ku的重组融合蛋白,在37℃、IPTG浓度为1.0mmol/L、诱导6h的情况下表达效果最好。重组蛋白经纯化后进行的Western-blot分析证实,表达、纯化的弓形虫RH株HSP40蛋白具有良好的反应原性,与弓形虫基因Ⅰ型的RH株、基因Ⅱ型的PRU株以及基因型为ToxoDB9的TgC7株和GJS株的阳性血清均可发生特异性反应,预期可作为弓形虫病ELISA诊断方法的候选抗原。本研究结果为弓形虫病新型诊断方法的建立奠定了基础。

分类号： S852.723

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