基于单克隆抗体的O型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 许智强

作者： 许智强;李敏杰;刘彦玲;周国辉;于力

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;单克隆抗体;固相竞争ELISA

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2020 年 002 期

页码： 145-149

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立评价O型口蹄疫病毒(FMDV)疫苗免疫水平的方法,本研究以单克隆抗体(MAb)3D9为捕获抗体,以HRP标记的MAb 8E8作为检测MAb,经过条件优化建立了基于MAb的检测O型FMDV抗体的固相竞争ELISA(SPCE)方法.对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验.结果显示,MAb 3D9的最佳稀释度为1:25 000,灭活O型FMDV抗原的最佳稀释浓度为1:3,HRP标记的MAb 8E8的最佳稀释度为15 000,当血清1:32稀释时,检测的临界值确定为45%.该方法分别检测A型FMDV抗体阳性参考血清以及牛冠状病毒、牛轮状病毒以及猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒的标准阳性血清,检测结果均为阴性,未出现交叉反应.经检测,当阳性标准血清的抗体稀释度在1:512时,该方法仍具有较好的敏感性;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明其重复性较好.并将该方法与液相阻断ELISA(LPBE)方法和病毒中和试验(VNT)的相关性进行了比较,结果显示该方法与LPBE和VNT的相关性分别为0.896和0.923.本研究为国内评价O型FMDV疫苗免疫水平建立了一种新的方法.

分类号： S852.65

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