文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘庆伟
作者: 刘庆伟;邱亚峰;王晓杜;郭林;刘超;沈阳;李向东;单虎;马志永
作者机构: 中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室;青岛农业大学动物科技学院
关键词: 伪狂犬病病毒;抗PRVgC抗体;Westernblotting
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2011 年 38 卷 03 期
页码: 108-112
收录情况: 北大核心
摘要: 用纯化的重组蛋白His-gCN813制备抗PRV-gC抗体,并分析伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC蛋白在真核细胞的表达情况。本研究以提取的病毒基因组为模板,PCR克隆PRV gC全长基因,构建gC真核表达质粒p3xFLAG-gC,在真核细胞中表达gC基因;纯化蛋白His-gCN813制备的抗体,Western blotting和间接免疫荧光(IFA)检测到p3xFLAG-gC转染真核细胞和PRV感染细胞中的gC蛋白。结果表明本试验成功构建了PRVgC基因真核表达系统,获得了特异性抗PRV gC抗体,重组gC真核表达质粒p3xFLAG-gC转染Vero细胞,表达的重组蛋白gC为72 ku,PRV感染Vero细胞,表达的gC蛋白为55、72和94 ku,主要定位在细胞浆,gC蛋白可以作为PRV感染的指示分子,为下一步研究PRV和宿主相互作用及PRV的复制奠定了基础。
分类号: S852.65
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