流感病毒NS1蛋白与宿主蛋白DOK6的相互作用研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄山雨

作者： 黄山雨;梁立滨;李俊平;王倩;赵青青;周陈陈;赵玉辉;王广文;李奇兵;孔凡迪;李呈军;陈化兰;姜丽

作者机构：

关键词： 流感病毒;NS1蛋白;DOK6蛋白;蛋白相互作用

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 41 卷 010 期

页码： 987-992

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： A型流感病毒非结构蛋白1(NS1)是病毒编码的必需蛋白,在病毒复制周期中发挥重要作用.NS1蛋白在病毒侵入宿主后大量表达,抑制宿主干扰素通路的激活,选择性关闭宿主基因的表达且能够增强病毒蛋白的表达.为研究宿主DOK6蛋白与NS1蛋白的相互作用关系,本研究利用重组质粒pCAGGS-V5-DOK6、pCAGGS-Flag-NS1共转染293T细胞,利用免疫共沉淀试验(Co-IP)检测,结果显示沉淀NS1蛋白后能够检测到DOK6蛋白条带,表明DOK6蛋白与NS1蛋白存在相互作用;将二者共转染A549细胞后利用激光共聚焦显微镜观察,发现二者在细胞质中存在共定位,表明两种蛋白在细胞质中发生相互作用.通过双分子荧光互补试验(BiFC)检测,结果显示NS1蛋白能够与DOK6蛋白的磷酸化酪氨酸结合结构域(Phosphotyrosinebindingdomain,PTB)结合从而发出较强荧光,表明NS1蛋白能够与DOK6蛋白(PTB)结构域发生相互作用.本研究进一步完善了A型流感病毒NS1蛋白参与的复杂分子间相互作用网络,为深入理解流感病毒在宿主体内复制的分子调控机制奠定了基础.

分类号： S852.65

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