苯巴比妥单克隆抗体的研制及竞争ELISA血药浓度监测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王自良

作者： 王自良;王建娜;张海棠;王选年;杨艳艳;张改平

作者机构：

关键词： 苯巴比妥;单克隆抗体;竞争ELISA;血药浓度;监测

期刊名称： 中国药学杂志

ISSN： 1001-2494

年卷期： 2006 年 41 卷 23 期

页码： 1826-1830

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的研制苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb),建立PB血药浓度竞争ELISA监测方法。方法将PB改造成对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法合成免疫原BSA-pAPB并免疫Balb/c小鼠;细胞融合技术筛选PBmAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PBmAb;应用PBmAb研制PB血药浓度监测竞争ELISA试剂盒(PB-Kit),并测定其性能。结果BSA-pAPB偶联成功;筛选出4株杂交瘤细胞,应用其中最好的4E6株制备的PBmAb间接ELISA效价为1∶6·4×105,亲和常数(Ka)为2·08×1010L·moL-1,50%抑制浓度(IC50)为9·84μg·L-1,与巴比妥的交叉反应率(CR)为7·9%,与其他化合物无CR;PB-Kit的检测范围为1·0~128μg·L-1,灵敏度为0·89μg·L-1,检测限为1μg·L-1,血清样添加回收率为94·7%,批内和批间变异系数均<10%;PB-Kit与差示分光光度法(DS)的符合率为100%。结论成功研制出高价、敏感、特异的PBmAb,建立了PB血药浓度竞争ELISA监测方法。

分类号： R96

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