一株PRRSV N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李敏华

作者： 李敏华;王倩;田志军;金涛

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;单克隆抗体;细胞融合;N蛋白;表位鉴定

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 3 期

页码： 279-283

摘要： 为了制备具有阻断能力的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体(MAb),本研究以PRRSV SD53株感染Marc-145细胞后的上清作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得一株稳定分泌抗PRRSV MAb的杂交瘤细胞株(1H4).鉴定结果显示,1H4 MAb是Ig G1亚类,轻链为κ链.1H4细胞上清经间接免疫荧光(IFA)检测其效价是1∶40,腹水的IFA效价是1∶3 200.阻断ELISA试验显示1H4 MAb与病毒的结合能够被PRRSV阳性血清阻断.Western blot试验显示1H4 MAb可以特异性识别PRRSV的N蛋白,经截短表达N蛋白鉴定该MAb的抗原识别序列为N蛋白末端aa 107~aa 123.该抗原表位在美洲型PRRSV中高度保守,该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的PRRSV阻断ELISA检测方法奠定了基础.

分类号： S852.651

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