传染性造血器官坏死病毒抗原表位富集区的原核表达及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陶健

作者： 陶健;徐黎明;刘淼;赵景壮;曹永生;卢彤岩;尹家胜;刘红柏

作者机构：

关键词： 传染性造血器官坏死病毒;G蛋白;原核表达;抗血清

期刊名称： 淡水渔业

ISSN： 1000-6907

年卷期： 2015 年 02 期

页码： 49-55

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以传染性造血器官坏死病毒Sn1203株(IHNV-Sn1203)基因组RNA提取物为模板,利用生物信息学软件分析,通过RT-PCR一步法扩增截短的G蛋白基因序列(约375 bp),将其克隆到表达载体p ET-27b中,构建重组表达质粒p ET-27b-IHNV-short G,通过大肠杆菌Rosetta表达菌株获得高效表达。在IPTG浓度为0.25 mmol/L时,37℃诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析显示目的蛋白相对分子质量约为14 000,符合预期大小,并以包涵体的形式表达,4 h时目的蛋白表达量最大。蛋白经变性、复性处理后获得不带任何标签的纯化蛋白,并利用该蛋白制备兔抗血清。ELISA结果显示,兔抗血清的效价为1∶80 000,说明制备的兔抗血清能够识别表达的重组蛋白;间接免疫荧光结果表明兔抗G蛋白血清具有良好的特异性,并且与VHSV参考毒株没有任何交叉反应。

分类号： S941

  • 相关文献

[1]鹅细小病毒VP基因片段的原核表达及抗血清的制备. 匬昱昊,王静,王懂帅,韩宗玺,刘胜旺,冉多良,孔宪刚. 2006

[2]鸡补体C3d抗血清的制备与应用. 闫敏鑫,黄秀芬,任慧英,刘杉杉,姜良,李永清. 2015

[3]黄瓜S期激酶相关蛋白Skp1的原核表达及其多克隆抗体的制备. 孙新艳,魏莹,韩晓玉,王振跃,陈琳琳,燕照玲,施艳. 2017

[4]甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备. 秦艳红,乔奇,王爽,张德胜,王永江,田雨婷,张振臣. 2018

[5]禽流感病毒PB2亚单位抗血清的制备. 葛叶,邓国华,李雪平,陈化兰. 2010

[6]烟草环斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备. 朱常香,宋云枝,王玫玫,王秀芳,温孚江. 2005

[7]番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备. 郑宽瑜,董家红,尹跃艳,方琦,苏晓霞,张仲凯. 2015

[8]瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备. 施艳,王振跃,袁媛,刘珊珊,孙虎,古勤生. 2013

[9]马铃薯卷叶病毒缺失突变CP基因的原核表达及抗血清的制备. 隋炯明,何心凤,郭真,李广存,王晶珊,郭宝太. 2012

[10]大麦黄矮病毒GPV株系ORF4基因在大肠杆菌中的表达及特异抗血清的制备. 吴茂森,王振跃,张文蔚,成卓敏. 2004

[11]大黄鱼(Pseudosciaena crocea)热激蛋白的基因克隆、原核表达及抗血清的制备. 张祖兴,李明云,陈炯,邬勇. 2006

[12]番茄环纹斑点病毒Gn蛋白的原核表达及多抗血清制备. 郑宽瑜,尚卫娜,张洁,郑雪,董家红. 2017

[13]猪带绦虫组织蛋白酶B基因的克隆表达及抗血清的制备. 孙铭苑,方怀盛,才学鹏. 2015

[14]甘薯脉花叶病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备. 张业辉,秦艳红,乔奇,张德胜,田雨婷,王永江,张振臣. 2011

[15]瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备. 施艳,袁媛,孙虎,古勤生,刘珊珊,王振跃. 2013

[16]鸡朊蛋白的原核表达及其抗血清的制备. 罗鹏,吴润,刁小龙,管宏伟,张莉. 2012

[17]水稻黑条矮缩病毒p8蛋白的原核表达、抗血清制备及其特性. 羊健,张恒木,陈剑平,戴良英. 2007

[18]人抗凝血酶Ⅲ的表达及其抗血清的制备. 卜澍,王洪梅,孙涛,刘文浩,王立群,何洪彬. 2013

[19]香蕉束顶病毒海口分离物Rb蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗血清制备. 冯团诚,余乃通,刘志昕. 2010

[20]甘薯潜隐病毒外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备. 黄玉娜,张振臣. 2007

作者其他论文 更多>>

微信小程序