转HAL1基因大豆侧翼序列分析及特异性检测方法研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蔡勤安

作者： 蔡勤安;尚丽霞;姜志磊;于志晶;马瑞

作者机构：

关键词： 大豆;转基因;侧翼序列分析

期刊名称： 大豆科学

ISSN： 1000-9841

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 32-38

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为方便HAL1转基因大豆的研究和检测,以转HAL1基因大豆T3代基因组DNA为模板,使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)方法分离其外源基因插入位点的侧翼序列,获得了插入片段DNA序列(T-DNA)的左翼序列和右翼序列。通过比对大豆基因组序列确定其整合位点,确定了HAL1基因的T-DNA在大豆基因组1号染色体非编码区49468395位点以单拷贝插入,转基因事件不影响大豆基因组功能基因的正常表达,而且在200 mmol·L~(-1)NaCl盐胁迫下转基因植株生长力明显强于对照材料。蛋白定量检测结果表明,在叶片中蛋白含量最高可达0.03 mg·g~(-1),在根茎花中也有表达,但是含量较低。根据整合位点处的左右侧翼序列设计两对特异性PCR检测引物,PCR检测结果显示只有转HAL1基因大豆阳性材料才能扩增出926和816 bp DNA片段。本研究建立的转HAL1基因大豆特异性定性检测方法,对转基因大豆的研究具有重要的意义,也为大豆转基因受体材料的管理与检测提供参考。

分类号： S565.1

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