农杆菌介导的菜心遗传转化体系的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张国裕

作者: 张国裕;王岩;程智慧;王晓武

作者机构:

关键词: 菜心;根癌农杆菌;遗传转化;子叶;转基因植株

期刊名称: 西北农林科技大学学报. 自然科学版

ISSN: 1671-9387

年卷期: 2006 年 34 卷 9 期

页码: 60-64

收录情况: CSCD

摘要: 以建立的菜心高频再生体系为基础,利用GUS染色组织分析法研究了根癌农杆菌菌株、乙酰丁香酮(AS)、预培养时间、浸染时间和共培养时间等因素对菜心((Brassica campestris L.var.parachinesis)子叶遗传转化的影响,探讨了适宜菜心转化的卡那霉素与抑菌抗生素使用浓度.结果表明,农杆菌菌株AGL0对菜心的浸染能力最强,添加100μmol/L的乙酰丁香酮有利于菜心转化;子叶外植体预培养2 d后浸染(菌液浓度OD600值为0.8)15 min,共培养2 d,然后转移到含15 mg/L卡那霉素和100mg/L Ticarcillin的筛选培养基上,进行转化植株的再生,植株再生率及外植体GUS阳性率均较高,是较优的转化条件;本试验共获得8株转化植株,转化率达2.44%,经PCR分析和Southern杂交检测表明,GUS基因已整合进入菜心基因组.

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