绵羊Myostatin基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 盛鹏程

作者： 盛鹏程;朱瑞良;苗向阳

作者机构：

关键词： RNA干扰;shRNA;肌肉生长抑制素;慢病毒;qPCR

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2012 年 04 期

页码： 628-632

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对绵羊Myostatin基因特异性序列,设计4对shRNA,并合成高表达载体。将干扰质粒和高表达载体瞬时共转染HEK293细胞,应用Real-time PCR鉴定干扰效率,将筛选到最有效的shRNA表达载体和pDONR221载体进行BP重组反应,以获得含干扰序列的入门载体。然后将含干扰序列的入门载体和慢病毒表达的目的载体pLenti6/BLOCK-iT-DEST进行LR重组反应,以获得含干扰序列的慢病毒表达载体。qPCR检测病毒物理滴度。结果本试验成功构建绵羊Myostatin基因RNAi慢病毒载体,病毒的滴度为:9.3×109 TU/mL。为研究Myostatin基因对肌肉生长的影响提供了稳定感染细胞载体。

分类号： S826

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