含铁蛋白cyb5融合基因莱茵衣藻核转化表达载体的构建及转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李明泽

作者： 李明泽;程奇

作者机构：

关键词： 细胞色素b5;信号肽;增强型荧光蛋白;衣藻核转化;玻璃珠转化法

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2013 年 29 卷 30 期

页码： 148-158

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在构建并转化细胞色素cytb5基因的衣藻核转化表达载体,为其在衣藻叶绿体中对铁的利用情况研究奠定基础。将克隆的PsaD信号肽、细胞色素b5和增强型绿色荧光蛋白基因的基因融合,插入到pDBle载体中;采用玻璃珠法,将重组子导入莱茵衣藻(CW15)中;经博来霉素筛选获得转基因植株并鉴定。本项研究通过分子克隆技术获得了衣藻自身来源的PsaD信号肽、裂殖酵母来源的细胞色素b5和常用增强型绿色荧光蛋白基因片段;重组质粒pDBle-b5、pDBle-bG和pDBle-TbG测序完全正确;经博来霉素抗性筛选,获得转化衣藻单克隆;通过PCR检测转化衣藻基因组DNA,扩增片段与预期相符。实验结果表明,成功构建了pDBle-b5、pDBle-bG和pDBle-TbG衣藻核转化表达载体,重组质粒已整合到莱茵衣藻基因组中。

分类号： Q943.2

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