利用柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)表达载体系统在柞蚕蛹中表达人生长激素

文献类型： 中文期刊

第一作者： 叶博

作者： 叶博;王林美;赵振军;岳冬梅;张波;李树英;范琦

作者机构：

关键词： 柞蚕核型多角体病毒表达载体系统;柞蚕蛹;人生长激素;体外活性

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2014 年 40 卷 02 期

页码： 277-283

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)表达载体-柞蚕蛹表达系统用于表达哺乳动物活性蛋白的可行性,利用该表达系统表达医用蛋白人生长激素(hGH)。构建插入hgh基因的转移表达载体pApM748BE/hgh,将该转移表达载体质粒DNA与病毒ApNPV-Δph/egfp+基因组DNA共转染樗蚕(Philosamia cynthiam)培养细胞Pc-01,用末端稀释法筛选获得重组病毒ApNPV-Δph/Δegfp/hgh+。采用Western blotting和ELISA方法,检测到柞蚕蛹感染重组病毒ApNPV-Δph/Δegfp/hgh+后第7天体液中就有hGH明显表达;感染后第13~14天蛹体液中的hGH含量保持较高水平,重组hGH的最高表达量可达251.18μg/mL;感染后第15~20天仍可以检测到hGH的表达,但表达产物出现降解现象。用活化的人红白血病细胞K562检测利用ApNPV表达载体系统在柞蚕蛹表达的重组hGH的体外活性,结果显示其对K562细胞的增殖具有明显的促进作用。

分类号： S884.5

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