水稻表达HA蛋白为探针研制H9亚型禽流感抗体半定量快速检测试纸

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李雪洋

作者： 李雪洋;牛香香;许倩茹;杨继飞;王雅楠;张申立;屈小天;陈金炫;张二芹;张改平

作者机构：

关键词： H9N2亚型禽流感;水稻源HA蛋白;半定量免疫层析试纸;血凝抑制试验

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 1137-1142,1199

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立一种禽流感H9亚型抗体半定量快速检测试纸，用于H9亚型禽流感（AIV）抗体的评价。含HA蛋白水稻粉末用提取液溶解后，离心，取上清，即为HA蛋白粗提液。其经过Q阴离填料和HA单抗亲和纯化，通过SDS-PAGE鉴定，重组HA蛋白纯度达到90%以上。利用胶体金标记纯化HA蛋白为探针，兔抗鸡IgG和HA的多抗分别作为检测线和质控线，依据高致病性禽流感HI诊断技术标准，建立一种适用于监测AIV H9亚型的半定量试纸检测方法。结果表明：胶体金标记HA蛋白量为30 mg/L,兔抗鸡IgG和HA多抗最佳包被质量浓度分别为1.0和1.2 g/L。试纸检测H9N2亚型阳性血清（HI为11 log2）的最低检出限是1∶12 800,这相当于HI效价的4 log2。试纸与H5 AIV、新城疫病毒（NDV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）、新城疫病毒（NDV）和马立克病病毒（MDV）阳性血清以及H9亚型阴性血清无交叉反应，在室温下至少能保存6个月，与HI试验平行检测比较，两者的符合率为90.6%。因此本试验研制了一种简单、快速、准确、特异的半定量免疫层析试纸，适用于H9N2亚型抗体临床检测。

分类号： S855.3

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