文献类型： 中文期刊

作者： 刘岩 ¹ ; 吕志强 ² ; 张存 ³ ; 祝新荣 ¹ ; 石团员 ⁴ ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院蚕桑研究所浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地

2.浙江省农业科学院蚕桑研究所

3.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

4.河南农业大学牧医工程学院

关键词： 微球疫苗;丝素;壳聚糖;IBDV;VP2/4/3;免疫原性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2014 年 30 卷 03 期

页码： 393-403

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了制备传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)DNA微球疫苗,并评价其免疫效果。以丝素蛋白(Silk fibroin,SF)/壳聚糖(Chitosan,CS)为壁材,IBDV的VP2/4/3 DNA疫苗为芯材,通过戊二醛和Na2SO4介导的乳化交联技术,制备出SF/CS复合微球疫苗,然后经肌肉注射14日龄非免疫鸡,2周后加强免疫一次,酶联免疫法(ELISA)定期监测鸡血清的IBDV抗体,以研究微球化疫苗的免疫原性。结果显示:戊二醛介导交联方法影响荷载DNA疫苗的活性,而Na2SO4介导的交联方法操作简单且不影响荷载DNA活性;建立了以壳聚糖浓度0.5%(pH 5.0)、丝素蛋白浓度0.6%,质粒DNA 500μg/mL溶解在2%Na2SO4溶液中的工作条件;SF-CS复合微球DNA疫苗荷载率89.14%,大小1.98μm,对DNaseⅠ的消化有保护作用。免疫后的抗IBDV血清ELISA抗体的检测显示,微球免疫组总体高于质粒疫苗免疫组(P<0.05),而且SF/CS复合微球组免疫反应要略高于单纯CS包被的抗原组。研究表明,丝素蛋白/壳聚糖作为微球佐剂能提高IBDV DNA疫苗的临床免疫效果,有很好的应用前景。