文献类型： 中文期刊

作者： 张艳 ¹ ; 谢金文 ¹ ; 刘博 ¹ ; 曹宗喜 ¹ ; 谷英华 ¹ ; 魏凤 ¹ ; 王文秀 ¹ ;

作者机构： 1.海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室;海南省农业科学院畜牧兽医研究所;山东省滨州畜牧兽医研究院;山东省院士工作站;山东绿都生物科技有限公司

关键词： 猪视网膜上皮细胞;组织块贴壁法;细胞角蛋白

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2023 年 55 卷 001 期

页码： 54-59

收录情况： 北大核心

摘要： 旨在建立猪视网膜上皮细胞(PRECs)的分离纯化及传代培养方法.采用组织块贴壁法和消化法分离猪视网膜细胞(PRCs),经差速消化法纯化细胞,筛选确定最优培养条件并鉴定细胞生物学特性.结果:消化法分离的细胞约1周长成单层,组织块贴壁法约2周长满单层,但活力更高;PRCs主要形态为长梭形和大理石样,呈现为2种形态细胞混合生长;差速消化法纯化细胞后,经间接免疫荧光鉴定细胞角蛋白(CK18和CK19),确定该细胞为上皮细胞;细胞接种猪圆环病毒2型(PCV2)可产生明显病变.综上,本试验成功分离获得PRECs,含胎牛血清浓度为12%的α-MEM为最优培养基,该细胞支持PCV2增殖并产生明显的细胞病变,为进一步建立稳定传代的猪视网膜上皮细胞系及研究PCV2感染及致病机理提供基础.