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抗鳞翅目害虫基因cry1C的抗原表位分析及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 金永梅 1 ; 陈莫军 1 ; 刘笑笑 1 ; 林秀峰 1 ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院

关键词： 鳞翅目害虫;cry1C;抗原表位;序列优化;多克隆抗体

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2018 年 34 卷 09 期

页码： 224-229

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用生物信息学方法预测cry1C蛋白的抗原表位区,并命名为Δcry1C。优化Δcry1C的核苷酸序列并进行人工合成,构建重组表达载体pET28b(+)-Δcry1C。在E.coli中诱导表达His6-Δcry1C蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,分离、纯化获得cry1C多抗血清。ELISA测定结果表明,抗体效价最高可达1∶512 000。Western Blot分析结果表明,cry1C多克隆抗体能够与cry1C转基因抗虫水稻蛋白特异性结合。利用生物信息学筛选抗原表位区并优化序列、原核表达重组蛋白、免疫制备cry1C多克隆抗体,为深入研究抗鳞翅目害虫植物提供了前提条件。

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