文献类型: 中文期刊
作者: 叶峻宁 1 ; 邓铭 1 ; 薛慧雯 1 ; 柳广斌 1 ; 邹娴 2 ; 孙宝丽 1 ; 郭勇庆 1 ; 刘德武 1 ; 李耀坤 1 ;
作者机构: 1.华南农业大学动物科学学院
2.广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室
关键词: 雷州山羊;mRNA;lncRNA;背最长肌
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2023 年 003 期
页码: 989-1002
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 旨在分析雷州山羊胎儿70、90及120天背最长肌转录组测序中的差异表达mRNAs和lncRNAs及其靶基因,对差异表达基因进行功能富集分析,挖掘影响雷州山羊胎儿骨骼肌发育的关键候选基因。本研究选用年龄约2.5~3.5岁,饲养状况相同,健康无病,体重接近的雷州母山羊,分为妊娠期70、90和120天3组,每组各3只共9只,提取其胎儿背最长肌的RNA构建文库后使用Illumina HiSeqTM2500进行转录组测序,以Q<0.05为阈值筛选出差异mRNAs和lncRNAs并进行生物学功能富集分析及构建靶向关系网络。最后通过荧光定量PCR鉴定差异基因表达水平,验证测序结果的可靠性。结果发现,在M70 vs. M90组中,总共发现185个差异表达mRNAs,其中170个上调,15个下调,62个差异表达lncRNAs, 40个上调,22个下调;在M120 vs. M90组中,共发现1 048个差异表达mRNAs, 666个上调,382个下调,352个差异表达lncRNAs, 175个上调,177个下调。其中TNNT3、TNNI1、TNNT1、TNNI2、ITGA4、ITGA11、ITGB4等基因参与肌肉发育相关的调控通路如肌钙蛋白复合物、肌丝、粘附斑、ECM-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路等。根据lncRNA与mRNA的位置关系进行cis靶基因预测,总共筛选到37 464个靶基因,有10个差异表达mRNAs被差异表达lncRNA靶向,其中NDUFB2、BRAF、METTL7B和ITGA7参与粘着斑以及肌动蛋白细胞骨架的调控,METTL7B和ITGA7还参与PI3K-Akt信号通路,lncRNA TCONS_00214300靶向METTL7B和ITGA7。同时,8个差异表达mRNAs和lncRNAs的RT-PCR结果显示,8个基因的表达水平与转录组测序的表达趋势相似,说明测序结果可靠。结果显示,发现了影响雷州山羊胎儿肌肉发育的mRNA与lncRNA,发现了一些差异表达lncRNA和mRNA可能存在调控关系,对了解雷州山羊胎儿肌肉发育的分子调控机制提供了新的参考,也为雷州山羊分子选育提供了理论借鉴。
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