文献类型： 中文期刊

作者： 向国庆 ¹ ; 宋帅 ¹ ; 温肖会 ¹ ; 吕殿红 ¹ ; 贾春玲 ¹ ; 牛瑞辉 ¹ ; 顾有方 ² ; 罗胜军 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

2.安徽科技学院动物科学学院动物营养调控与健康安徽省重点实验室

关键词： 非洲猪瘟病毒;重组pp62蛋白;羧基磁珠;化学发光检测方法

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2023 年 012 期

页码： 5614-5624

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】非洲猪瘟（African swine fever, ASF）作为高致病性传染病，给我国生猪养殖业造成了严重的经济损失，因此建立快捷、灵敏的诊断方法至关重要。【目的】建立一种管式非洲猪瘟病毒pp62蛋白化学发光抗体检测方法。【方法】以重组pp62蛋白作为包被抗原，羧基磁珠（carboxylic magnetic beads）作为固相载体，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, AP）标记的兔抗猪IgG作为酶标二抗，通过对反应条件进行优化，采用非洲猪瘟国家参考品作为溯源血清绘制出标准曲线，建立基于ASFVpp62蛋白的化学发光抗体检测方法。【结果】用建立的化学发光方法检测277份临床样品血清，通过受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线分析确定阴性、阳性临界值，并确定判定标准：浓度值＞140.02 U时为抗体阳性，浓度值＜140.02 U时为抗体阴性。此方法对6种不同的病原血清抗体进行检测均无交叉反应，且批内和批间变异系数均在10%以内，与商品化非洲猪瘟抗体检测试剂盒的符合率达96.7%。【结论】本研究建立的管式非洲猪瘟病毒化学发光抗体检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可为非洲猪瘟早期监测及试剂盒研发提供参考。