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鸡瘦素受体胞外域成熟肽重组蛋白质的表达以及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 雷明明 1 ; 吴思谦 2 ; 李孝伟 2 ; 施振旦 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所动物品种改良和繁育重点实验室

2.华南农业大学动物科学学院

关键词： 瘦素受体;成熟肽序列;克隆和表达;多克隆抗体

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2015 年 05 期

页码： 1105-1109

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鸡瘦素受体基因(LEPR)编码区序列(Gen Bank:NM_AB033383)设计并合成2对引物,以鸡肝脏c DNA为模板扩增鸡LEPR胞外域2段c DNA序列。然后将这2段序列克隆到表达载体pRSET-A的Bam H I和Hind III酶切位点之间,构建重组表达载体(pR-LEPR1和pR-LEPR2)并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。转化菌在IPTG诱导后分别表达了分子量为2.62×104的LEPR1和分子量为2.86×104的LEPR2重组蛋白质。经凝胶NiNTA纯化后的重组蛋白质与矿物油佐剂混合免疫生长鸡,经过3次免疫之后,获得高效价的抗LEPR1和抗LEPR2抗血清。

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