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应用正交设计对大白菜纯度鉴定中EST-SSR反应体系的优化

文献类型: 中文期刊

作者: 赵新 1 ; 贺长征 2 ; 兰青阔 1 ; 陈锐 1 ; 齐志伟 2 ; 李欧静 1 ; 朱珠 1 ; 王永 1 ; 郭永泽 1 ;

作者机构: 1.天津市农业质量标准与检测技术研究所

2.天津市种子管理站

关键词: 大白菜;纯度鉴定;正交设计;EST-SSR;优化

期刊名称: 天津农业科学

ISSN: 1006-6500

年卷期: 2013 年 19 卷 03 期

页码: 1-4

摘要: 以3份大白菜杂交种及其亲本为试验材料,利用改良CTAB法提取基因组DNA,采用正交设计对Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA和Taq酶5因素4水平进行优化,结果表明,适用于大白菜纯度鉴定EST-SSR检测体系为:在10μL反应体系中包含3.0mmol·L-1MgCl2、400μmol·L-1dNTPs、0.20μmol·L-1SSR引物、4ng模板DNA和0.05UTaq酶。利用该优化的体系,对3份大白菜杂交种进行单株育苗试验,每份杂交种取单株140株进行纯度鉴定。结果显示,扩增带型清晰、稳定,纯度检测结果与田间试验结果基本吻合,可用于大白菜种子纯度分子标记的进一步研究。

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