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芪合酶基因的克隆与植物表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 谭琳 1 ; 郑学勤 2 ; 康由发 2 ; 施江 2 ;

作者机构： 1.海南医学院生化教研室

2.中国热带农业科学院生物技术国家重点实验室

关键词： 芪合酶基因;PCR;植物表达载体

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2003 年 24 卷 02 期

页码： 42-45

收录情况： CSCD

摘要： 为获得含白藜芦醇且具有保健作用的转基因番茄,进行了芪合酶基因克隆、植物表达载体构建及导入受体细胞的研究。从葡萄2个品种———雷司令和粉红玫瑰的叶片中提取基因组DNA,并以其为模板,经PCR扩增芪合酶基因,各获得一长约1.6Kb的片段,将这2个片段分别连接到pGEM-Teasy和pUCm-T上进行测序,1个片段长为1622bp(命名为S1),另一个片段长为1617bp(命名为S2)。然后将S1正向插入pEV2的果实特异性启动子TFP2和NOS终止子,构建了植物表达载体pEV2S1;将S2正向插入植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建了植物表达载体pBS2。将重组体pEV2S1和pBS2转化大肠杆菌E.coliXL1,并对重组体进行了筛选和鉴定。

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