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CRISPR/Cas9基因编辑技术介导SST基因敲除细胞的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 王紫君 1 ; 任红艳 1 ; 肖红卫 1 ; 华再东 1 ; 毕延震 1 ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院 畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

关键词： CRISPR/Cas9;基因编辑;SST基因;猪;敲除

期刊名称： 江西农业学报

ISSN： 1001-8581

年卷期： 2020 年 32 卷 008 期

页码： 70-75

摘要： 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备了SST基因敲除的细胞.在猪SST基因第一外显子区域设计2个向导RNA(sgRNA),用PX459构建成表达质粒,电转染猪胎儿的成纤维细胞,在48 h后用嘌呤霉素筛选细胞.通过PCR扩增、测序检测,在获得的13个克隆中,有2株细胞未检测到基因敲除,4株细胞发生单等位基因敲除,7株细胞为双等位基因删除.筛选到的纯合子单克隆细胞可用于制备SST基因删除猪.

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