文献类型: 中文期刊
作者: 杜琳 1 ; 王丽芳 1 ; 姚一萍 1 ; 冯小慧 1 ; 宋洁 1 ; 张三粉 1 ; 史培 1 ;
作者机构: 1.内蒙古自治区农牧业科学院
关键词: 牛奶;布鲁菌;基因组;提取方法
期刊名称: 动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2018 年 011 期
页码: 48-52
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为筛选出适合牛奶中直接提取布鲁菌基因组DNA的提取方法,以牛奶中的布鲁菌作为研究对象,对几种常见的细菌基因组核酸提取方法进行比较,并采用多功能酶标仪和琼脂糖凝胶电泳法对提取的DNA质量进行评估.结果表明,碱裂解法、酚-氯仿抽提法和加热煮沸法提取的基因组DNA有酚类或蛋白残留,DNA纯度较差;CTAB法和Chelex-100法提取的基因组DNA有RNA污染;溶菌酶法、试剂盒法和SDS法提取的DNA质量较好;碱裂解法、酚-氯仿抽提法、试剂盒法条带较暗,提取得到的基因组DNA产物浓度较低;碱裂解法、加热煮沸法和Chelex-100法条带存在不同程度的降解;溶菌酶法、SDS法和CTAB法条带较为清晰和明亮.综合比较,SDS法对于牛奶中布鲁菌基因组DNA提取效果最好.试验对几种国内外常用的基因组DNA提取方法进行系统的比较,确立了牛奶中布鲁菌DNA的提取方法,为布鲁菌的分子生物学检测方法提供了试验依据.
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