文献类型： 中文期刊

作者： 王耀 ¹ ; 李燕虹 ¹ ; 曹金博 ¹ ; 孙亚宁 ² ; 邢云瑞 ² ; 陈秀金 ¹ ; 邓瑞广 ² ; 胡骁飞 ² ;

作者机构： 1.河南科技大学食品与生物工程学院

2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： Kunitz胰蛋白酶抑制因子;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称： 食品与机械

ISSN： 1003-5788

年卷期： 2019 年 35 卷 008 期

页码： 59-63

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备免疫学特性良好的大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子(Kunitz trypsin inhibitor,KTI)单克隆抗体,以50 μg/只的免疫剂量将KTI免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定多抗血清效价和敏感性,选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到稳定分泌KTI单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株,采用体内诱生腹水法制备mAb并对其免疫学特性进行鉴定.结果 表明,1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为157.33 ng/mL,经细胞融合筛选得到4E6-E9阳性杂交瘤细胞株,所制备的抗体效价达到1∶1 638 400,亚型为IgG1型,亲和常数为1.45×108 L/mol,IC50为28.39 ng/mL,且特异性强.说明试验所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立灵敏、特异的KTI免疫学检测方法提供良好的抗体保障.