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p53基因RNA干扰载体的构建及其在ST细胞系中的稳定表达

文献类型： 中文期刊

作者： 张春红 1 ; 刘志成 2 ; 孙俊颖 3 ; 卢宇 4 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所

2.上海市疾病预防控制中心

3.广东农科院动物卫生研究所

4.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： p53基因;sh RNA载体;RNA干扰;细胞系

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 08 期

页码： 979-985

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用质粒介导的RNA干扰技术,建立稳定沉默p53基因的ST细胞系。通过改造p EGFP-C1载体,构建了猪源U6启动子启动编码p53 sh RNA序列的载体,将其转染ST细胞,用G418筛选细胞,并分析获得细胞的生长特性。RT-PCR和Western-blot结果显示,质粒介导的sh RNA有效地沉默了p53基因的表达;流式细胞术和细胞生长特性分析结果显示,与对照组细胞相比,p53基因沉默组ST细胞处于S期的细胞数量增多,而且p53基因沉默组ST细胞生长较快。本研究结果证实质粒介导的sh RNA高效、稳定地沉默了ST细胞中p53基因的表达。

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