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抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇噬菌体单链抗体库的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 周艳红 1 ; 祭芳 1 ; 丁衬衬 1 ; 史建荣 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室

关键词： 脱氧雪腐镰刀菌烯醇;单链抗体;噬菌体抗体库

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2010 年 26 卷 05 期

页码： 1093-1097

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON毒素)杂交瘤细胞株中扩增出VH和VL基因片段,再经重叠延伸PCR拼接扩增得到单链抗体基因(ScFv),克隆到pCANTAB-5E噬菌粒载体上。然后转化感受态大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,构建成抗DON毒素噬菌体单链抗体库,库容约为1.1×105,滴度为1.3×108pfu。随机选取10个克隆进行双酶切鉴定,结果显示均有ScFv基因片段插入。抗DON毒素单链抗体库的构建,为进一步富集筛选并表达抗DON毒素单链抗体奠定了基础。

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