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利用双向电泳技术分离节瓜叶片总蛋白的方法研究

文献类型： 中文期刊

作者： 赵芹 1 ; 谢大森 1 ; 彭庆务 1 ; 郭巨先 1 ; 周念 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院蔬菜研究所

关键词： 节瓜;叶片总蛋白;蛋白质组学;双向电泳

期刊名称： 华南农业大学学报

ISSN： 1001-411X

年卷期： 2014 年 03 期

页码： 85-91

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立适合节瓜叶片蛋白质组学研究的双向电泳体系.【方法】以节瓜品种"A37毛节瓜"为材料,对蛋白质抽提方法、上样量、凝胶浓度及IPG胶条pH范围等关键因素进行探索与优化.【结果和结论】与TCA/丙酮沉淀法及酚提取法相比,改良酚提取法抽提蛋白质总量较高,纯度最高,SDS-PAGE电泳条带明显、清晰,双向电泳图谱蛋白质点最多、清晰均匀、纵横条纹少.利用17 cm pH 4~7范围IPG胶条、120μg蛋白质上样量、12%凝胶浓度,硝酸银染色获得蛋白质点数丰富、分辨率高、背景清晰且重复性好的双向电泳图谱,检测到节瓜叶片蛋白质点1 936个,相对分子质量主要分布于15 000~100 000之间.初步建立了一套适用于节瓜叶片蛋白质组学研究的双向电泳体系,为后续开展蛋白质组学研究及其相关工作奠定了基础.

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