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猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白5'端基因重组腺病毒的构建及其免疫特性

文献类型： 中文期刊

作者： 唐芳 1 ; 何孔旺 1 ; 侯继波 1 ; 姜平 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.南京农业大学动物医学院

关键词： 传染性胃肠炎病毒;S蛋白;重组腺病毒;免疫

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 01 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： RT-PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S蛋白基因5'端包含B、C抗原位点的1.0 kb DNA片段,并与穿梭载体pShuttle-CMV连接;然后与腺病毒(Adenovirus)骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌(Es-cherichia coli)BJ5183,通过同源重组获得重组腺病毒质粒。该重组腺病毒质粒转染HEK293细胞并进行噬斑纯化,获得了1株含有TGEV S蛋白5'端基因的重组人复制缺陷型血清5型腺病毒rAd-TGEV-S。随后用RT-PCR和间接免疫荧光(indirectimmunofluorescent assay,IFA)检测目的基因的转录与表达。重组腺病毒rAd-TGEV-S在HEK293细胞连续传代9次后,病毒效价稳定,滴度平均为107.7TCID50/mL。动物免疫试验显示,rAd-TGEV-S可以诱导小鼠产生TGEV特异性IgG和IgA。

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[1]RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒. 李军,林继煌,陆承平,何孔旺,倪艳秀,还红华,钱永清. 2001

[2]猪传染性胃肠炎病毒S蛋白主要抗原位点在昆虫细胞中的表达. 李菁,何孔旺,杨倩. 2009

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[4]传染性法氏囊病病毒株VP2基因在重组腺病毒中的表达. 潘群兴,王永山,何孔旺,欧阳伟,王晓丽,王忠灿,唐雨德. 2010

[5]表达猪流行性腹泻病毒S基因片段重组腺病毒的构建与免疫特性. 韦显凯,侯继波,姜平. 2008

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