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抗莱克多巴胺单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 张海棠 1 ; 王自良 1 ; 邓瑞广 2 ; 钟华 1 ; 范国英 1 ;

作者机构: 1.河南科技学院动物科学学院

2.河南省动物免疫学重点实验室

关键词: 莱克多巴胺;半抗原;人工抗原;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称: 食品科学

ISSN: 1002-6630

年卷期: 2009 年 30 卷 03 期

页码: 175-179

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 莱克多巴胺(RAC)经化学修饰引入功能基团羧基,合成半抗原RAC-戊二酸酐半醛化合物(RAC-SA),用混合酸酐法(MA)将RAC-SA偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用红外(IR)、紫外(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对其进行鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC的单克隆抗体(RAC mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-RAC偶联成功,偶联率为24.5:1;筛选出3F10、3H12、4D8共3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol,对RAC的半数抑制浓度(IC50)为5.7ng/ml,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR)为22.3%,与其他化合物无CR。

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