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表达猪流行性腹泻病毒S基因片段重组腺病毒的构建与免疫特性

文献类型: 中文期刊

作者: 韦显凯 1 ; 侯继波 2 ; 姜平 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

2.江苏省农业科学院

关键词: 猪流行性腹泻病毒;重组腺病毒;S基因;免疫原性

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2008 年 28 卷 10 期

页码: 1128-1132

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用RT-PCR、同源重组等技术构建了含有猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因上3个片段的重组腺病毒质粒pAd-S498~638,pAd-S1~638,pAd-S498~1384,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化分别获得了重组腺病毒rAd-S498~638,rAd-S1~638,rAd-S498~1384。重组腺病毒于HEK-293A细胞连续传代至20代效价稳定,TCID50分别为每毫升10-6.29、10-5.75、10-6.5。应用猪流行性腹泻病毒阳性血清进行间接免疫荧光抗体试验,在3个腺病毒感染的HEK-293A细胞的胞质见有清晰荧光。将3个重组腺病毒分别免疫小鼠,结果均诱导产生较强的体液免疫应答。结果表明这3个重组腺病毒对S基因的3个片段均可成功表达,并具有较好的免疫原性,为PEDV重组腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。

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