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大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

文献类型: 中文期刊

作者: 夏兴霞 1 ; 王永山 1 ; 孟祥升 1 ; 朱国强 2 ; 张雪寒 1 ; 何孔旺 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.扬州大学兽医学院

关键词: 大肠杆菌O157∶H7;单克隆抗体;胶体金;免疫层析试纸条;人兽共患病

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2010 年 32 卷 04 期

页码: 47-53

摘要: 用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。

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