文献类型： 中文期刊

作者： 张俊玲 ¹ ; 章炉军 ² ; 刘建辉 ² ; 李亮 ² ; 尚晓冬 ² ; 谭琦 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学生命科学学院

2.上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心

关键词： dsRNA技术;反转录PCR;FvBV;脱毒;原生质体单核化;有性生殖;核迁移

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2015 年 42 卷 10 期

页码： 1952-1961

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】评价5种不同脱毒方法对金针菇(Flammulina velutipes)菌株的脱毒效果,筛选出脱毒率高和脱毒后金针菇菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等性状改善明显的脱毒方法。【方法】以栽培金针菇菌株F-4889为研究材料,从菌丝体中提取大小约2.0 kb的病毒dsRNA,经RT-PCR鉴定该病毒为金针菇褐化病毒(FvBV)。采用菌丝尖端分离、原基组织分离、原生质体单核化、有性生殖和核迁移5种脱毒方法对金针菇菌株进行脱毒处理,利用dsRNA技术和RT-PCR检测脱毒效果。【结果】菌丝尖端分离脱毒后得到1株脱毒菌株;原基组织分离法未能脱毒;原生质体单核化脱毒法得到3株脱毒单核菌株和2株原单杂交脱毒菌株;有性生殖脱毒法获得脱毒孢子单核菌株23株和单孢杂交脱毒菌株8株;核迁移脱毒后得到5株核迁移脱毒菌株。脱毒率依次为25.0%、0、7.5%、57.5%和100%。脱毒菌株的菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均优于出发菌株、菌丝尖端和原基组织分离菌株。【结论】这5种方法中原生质体单核化、有性生殖和核迁移脱毒法脱毒效果较佳,均能有效脱除Fv BV,脱毒率高,脱毒后菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均明显提高。