文献类型： 中文期刊

作者： 王爱萍 ¹ ; 李发弟 ¹ ; 胡骁飞 ² ; 曾巧英 ¹ ; 李金录 ¹ ; 郭艳丽 ¹ ; 赵启法 ² ; 陈玉梅 ² ; 范璐 ² ;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物科学技术学院

2.河南省农业科学院免疫学重点实验室

关键词： 新霉素;单克隆抗体;阻断ELISA;试剂盒

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2011 年 42 卷 06 期

页码： 857-864

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒。以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定。结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 3;检测范围为1.0～64.0μg.L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.59μg.L-1,灵敏度为0.75μg.L-1,检测限为1.0μg.L-1。试剂盒除了和NEO阳性样品反应呈阳性外,与庆大霉素、链霉素、土霉素、沙丁胺醇、环丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他药物均无交叉反应性。奶样、饲料样及肉样的平均添加回收率为89.50%、89.58%和87.92%;平均批内和批间变异系数均小于15%,而且批间变异系数小于批内变异系数;基质对NEO-Kit的检测结果影响比较小;NEO-Kit在4℃可保存6个月以上。试剂盒和HPLC-MS-MS对牛奶中新霉素回收率没有显著差异(P≥0.05)。试剂盒和HPLC-MS-MS对饲料样检测结果也无显著差异(P≥0.05)。本研究成功研制出敏感、特异、准确的NEO检测试剂盒。