文献类型： 中文期刊

作者： 薛骁敏 ¹ ; 王伟 ² ; 孙晶晶 ² ; 江承程 ² ; 郝建华 ² ;

作者机构： 1.中国农业科学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所/农业农村部极地渔业可持续利用重点实验室

关键词： 萎缩芽孢杆菌;抗菌物质AsN;副溶血弧菌;发酵优化;菲律宾蛤仔;生物防治

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2025 年 21 卷 005 期

页码： 208-220

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是水产养殖中危害严重的病原体，而抗生素滥用导致的耐药性和生态风险问题日益突出。本研究通过优化海洋源萎缩芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus） N1的发酵工艺，提高了其抗菌物质（Antibacterial substances from N1, AsN）的产量，并利用菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）感染模型评估了AsN对副溶血弧菌的防控效果，旨在为水产养殖中副溶血弧菌的绿色防控提供新策略。通过单因素试验、Plackett-Burman设计、最陡爬坡试验和Box-Behnken响应面法优化发酵条件（温度、pH、接种量、时间）及培养基成分（氮源、碳源、氯化钠）；采用阴离子交换层析（DEAE）和凝胶过滤层析（Sephadex G-100）纯化AsN，得到分子质量约为63 kDa的抗菌蛋白；分析AsN的温度/pH稳定性、耐盐性及金属离子影响；建立菲律宾蛤仔感染模型，验证AsN对副溶血弧菌的抑制效果及存活率提升作用。结果显示，优化后AsN产量提升16.58%（抑菌圈直径17.16 mm），最佳培养条件为37℃、pH 8.0、6%（φ）接种量、30 h，最佳培养基含大豆分离蛋白10 g·L^-1、酵母提取物11 g·L^-1、氯化钠（NaCl） 12 g·L^-1；纯化获得63 kDa抗菌蛋白，4℃和pH 7.0条件下表现出最大抑菌活性，在较宽的温度（4～100℃）和pH（2.0～9.0）范围内保留抑菌活性。其耐盐能力强，在饱和NaCl溶液中24 h仍可高效抑菌。三价铁离子(Fe³⁺)增强抑菌效果，而钡离子(Ba²⁺)、锰离子(Mn²⁺)、钙离子(Ca²⁺)等抑制抗菌蛋白活性。AsN显著提高了菲律宾蛤仔感染存活率（达80%，接近抗生素效果，p<0.05）。研究表明，AsN具有广谱稳定性与强耐盐性，能有效替代抗生素防控副溶血弧菌感染。