文献类型： 中文期刊

作者： 赵景壮 ¹ ; 徐黎明 ¹ ; 刘淼 ¹ ; 曹永生 ¹ ; 尹家胜 ¹ ; 刘红柏 ¹ ; 卢彤岩 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

关键词： 传染性造血器官坏死病病毒;糖蛋白;真核表达;酵母表面展示

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2016 年 40 卷 07 期

页码： 1106-1113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 糖蛋白(glycoprotein,G)是鱼类传染性造血器官坏死病毒的主要表面抗原,是病毒检测及疫苗研制的主要靶基因。为了对其进行酵母表面展示,本研究利用本实验室保存的含有IHNV-Sn1203毒株G基因的质粒为模板,PCR扩增富含抗原表位的糖蛋白基因片段后,连接酵母表面展示载体p YD1,构建重组质粒p YD1-G。将p YD1-G转化酿酒酵母EBY100细胞后,利用半乳糖诱导G蛋白的表达。利用细胞免疫荧光、Western Blotting及流式细胞仪检测酵母表面G蛋白的表达情况。细胞免疫荧光结果显示,转化了p YD1-G重组质粒的酵母细胞表面呈现出特异性荧光;Western Blotting结果显示,经半乳糖诱导后G蛋白在酵母细胞表面获得了成功表达;流式细胞仪检测结果表明,随着半乳糖诱导时间的增加,G蛋白的表达量随之增加,并在诱导48 h时达到峰值。以上研究表明G蛋白在酵母细胞表面获得了成功表达,本研究为以酵母为活载体的新型口服疫苗的研制奠定了基础。