文献类型： 中文期刊

作者： 李艳 ¹ ; 张煜轩 ¹ ; 楚品品 ¹ ; 蒋智勇 ¹ ; 席振军 ¹ ; 蔡汝健 ¹ ; 勾红潮 ¹ ; 张昆丽 ¹ ; 宋帅 ¹ ; 卞志标 ¹ ; 李春玲 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

关键词： 非洲猪瘟病毒;p72基因;LNA引物;PCR检测方法

期刊名称： 中国农学通报

ISSN：

年卷期： 2021 年 029 期

页码： 107-113

收录情况： CSCD

摘要： 为了建立一种便捷、快速且精准的非洲猪瘟病毒的检测方法,本研究根据GenBank中公布的ASFV p72基因序列,设计了一对特异性引物,并对引物中的适当碱基进行锁核酸修饰,通过优化退火温度、引物浓度,建立了非洲猪瘟病毒的锁核酸修饰引物PCR检测方法。结果表明,该方法具有良好的敏感性和特异性,检测灵敏度可以达到3×101copies/uL,比常规引物PCR方法的灵敏度提高了100倍,比real-time PCR方法的灵敏度提高了10倍,对猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒等病原基因组均无扩增,特异性良好。72份临床样品的检测结果与OIE推荐的qPCR方法检测结果一致,符合率为100%。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒的LNA引物PCR检测方法,方法的特异性强、敏感性高,操作简单,为非洲猪瘟病毒的检测提供了一种新的、更加敏感的检测技术。