文献类型： 中文期刊

作者： 胡松青 ¹ ; 黄政 ² ; 刘光 ² ; 黄滟波 ² ; 李琳 ² ; 侯轶 ³ ;

作者机构： 1.华南理工大学食品科学与工程学院;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所;华南理工大学轻工科学与工程学院

2.;华南理工大学食品科学与工程学院;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所;华南理工大学轻工科学与工程学院

3.;华南理工大学食品科学与工程学院;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所;华南理工大学轻工科学与工程学院;

关键词： 小麦;蛋白质二硫键异构酶;结构域;截短蛋白;活性位点

期刊名称： 华南理工大学学报(自然科学版)

ISSN： 1000-565X

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 92-99

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 小麦蛋白质二硫键异构酶(wPDI)由4个硫氧还蛋白结构域a-b-b'-a'和C-末端c尾组成.为考察wPDI各结构域对活性的影响,通过亚克隆表达了8个不同结构域组成的wPDI截短蛋白,表达产物经分离纯化后进行了酶学性质研究和蛋白质电泳分析.结果表明,所设计的8个wPDI截短蛋白在大肠杆菌BL21中得到了表达,金属螯合亲和层析和分子排阻层析后获得了纯度较高的wPDI截短蛋白;活性测定结果表明,wPDI的所有结构域对其二硫键氧化还原活性和分子伴侣活性都有贡献,c尾缺失不影响其异构活性,但提供了分子伴侣活性的关键氨基酸结合位点;对截短蛋白A和A'的电泳分析发现,wPDI的a结构域活性位点主要以氧化态为主,而a'结构域主要以还原态为主.研究结果为深入理解wPDI的功能性质奠定了基础.