文献类型: 中文期刊
作者: 张海棠 1 ; 王自良 1 ; 邓瑞广 2 ; 钟华 1 ; 范国英 1 ;
作者机构: 1.河南科技学院动物科学学院
2.河南省动物免疫学重点实验室
关键词: 莱克多巴胺;人工免疫原;单克隆抗体;阻断ELISA;快速检测试剂盒
期刊名称: 核农学报
ISSN: 1000-8551
年卷期: 2008 年 22 卷 06 期
页码: 166-170
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 用混合酸酐法将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成免疫原BSA-RAC,并用紫外和凝胶电泳鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb。应用RAC mAb研制RAC残留快速检测阻断ELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为1∶24.5;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株的亲和常数Ka为1.65×1010L/mol。RAC-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1~170μg/L,灵敏度为0.52μg/L,检测限为1μg/L,饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为91.1%和89.2%,平均批内和批间变异系数<15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率为22.3%,与其他化合物无交叉反应,RAC-Kit在4℃可保存180d。
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