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沙门氏菌噬菌体多克隆抗体制备及其检测方法

文献类型: 中文期刊

作者: 李星辰 1 ; 李俊 2 ; 包红朵 2 ; 何涛 2 ; 王冉 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学动物科技学院

2.江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所

关键词: 沙门氏菌;噬菌体;抗体;间接ELISA

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2025 年 41 卷 006 期

页码: 1233-1239

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 噬菌体主要由蛋白质和核酸组成,进入动物体后可能会被机体认为是抗原,进而激发机体产生抗体。为深入研究噬菌体进入动物体内后抗体产生情况,本研究采用纯化后的广谱裂解性沙门氏菌噬菌体SCBS作为抗原,用新西兰大白兔开展多克隆抗体制备,最后成功获得了该噬菌体的多克隆抗体,并建立了SCBS噬菌体血清抗体的间接ELISA检测方法。抗原包被含量为1×10~9 PFU/mL,用2%牛血清白蛋白(BSA)封闭3 h,血清稀释度1∶500,血清反应时间60 min,酶标二抗稀释至1∶12 000后作用45 min, TMB显色液反应15 min后测定吸光度(OD450)。该检测方法特异性良好,阳性临界值为0.372,阴性临界值为0.310;批内变异系数为2.30%~7.11%,批间变系数为1.37%~9.25%。

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