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猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株Nsp10的表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 周思旋 1 ; 徐健 2 ; 周碧君 3 ; 文明 3 ; 王开功 3 ;

作者机构： 1.贵州省畜牧兽医研究所

2.贵州省贵阳市农业委员会

3.贵州大学动物科学学院

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;Nsp10;表达

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2012 年 0 卷 09 期

页码： 109-113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株非结构蛋白Nsp10,以克隆质粒pMD18-T-Nsp10/JL为模板,将Nsp10基因克隆至原核表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对不同温度和IPTG浓度进行优化,以获得Nsp10蛋白表达的最佳条件,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况,并通过Western blotting检测其免疫活性。结果表明,Nsp10基因成功克隆至pET-32a,有分子量约为43.4 kD的融合蛋白获得表达,重组蛋白于诱导4 h后达到高峰,IPTG浓度为0.2-1.2 mmol/L时,重组蛋白表达量无明显差异,Western blotting证实该表达蛋白具有反应原性。

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