文献类型： 中文期刊

作者： 黄欣梅 ¹ ; 李银 ¹ ; 赵冬敏 ¹ ; 刘宇卓 ¹ ; 张敬峰 ¹ ; 韩凯凯 ¹ ; 钮慧敏 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 禽黄病毒;E蛋白;原核表达;抗原性

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2012 年 27 卷 05 期

页码： 33-37

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 选取鹅黄病毒囊膜蛋白(E蛋白)基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断和可作为亚单位疫苗的重组蛋白。根据鹅黄病毒JS804株全基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR方法扩增出了鹅黄病毒的E基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-E,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。结果表明,鹅黄病毒E基因在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子量约为70 kDa,主要以包涵体形式存在于菌体中。Western Blot和间接免疫荧光试验发现,重组E蛋白具有较好的反应原性和良好的免疫原性。鹅黄病毒E蛋白的原核表达为进一步研究该蛋白功能、建立血清学检测方法及研制亚单位疫苗奠定了基础。