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应用巢式PCR法检测猪单个胚胎中的基因突变

文献类型： 中文期刊

作者： 任红艳 1 ; 肖红卫 1 ; 李晓敏 1 ; 徐振宇 1 ; 毕延震 1 ; 华再东 1 ; 郑新民 1 ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

关键词： 巢式PCR;单细胞裂解;CRISPR/Cas9技术;基因突变

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2016 年 43 卷 10 期

页码： 2566-2571

收录情况： 北大核心

摘要： 单胚胎基因突变检测技术是以单个胚胎的裂解产物为模板进行DNA或RNA分析的方法,该技术的建立将为在单细胞水平进行基因表达和突变检测提供简便而快捷的方法。本研究设计了2对巢式引物,以显微注射了Cas9mRNA和猪SS基因2个靶点的gRNA的四细胞期孤雌胚胎为试验材料,通过蛋白酶K对猪单个胚胎进行裂解后直接进行巢式PCR分型,并检测到猪胚胎中SS基因的删除突变。该方法可以最大限度减少假阴性和假阳性结果的出现,在猪基因突变检测中具有重要作用。

  • 相关文献

[1]猪SCD1和SCD5双基因敲除细胞系的构建及其对脂肪沉积的影响. 方钱海,郭帅,任红艳,白文哲,高斯,刘雯雯,陈洪波,张立苹. 2024

[2]柑橘黄龙病菌亚洲种分子检测引物评价及绝对定量PCR体系优化. 谢帆,龚顺,王泽琼,肖玉雄,杜志强,仝铸,何秀娟,邱文明,孙中海,潘志勇,肖翠. 2024

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