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噬菌体裂解酶结构域重构及其裂解功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张辉 1 ; 周艳 1 ; 包红朵 1 ; 杨振泉 1 ; 朱如意 1 ; 周晨露 1 ; 张莉莉 1 ; 王冉 1 ;

作者机构: 1.江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏省农业科学院;扬州大学食品科学与工程学院;江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心

关键词: 裂解酶;金黄色葡萄球菌;单核细胞增生性李斯特菌

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2017 年 06 期

页码: 134-138

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了获得广谱噬菌体裂解酶,根据裂解酶结构及种属特异性,将金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Ply187CHAP及酶K的SH3b重新合成,并同时将末端引入单核细胞增生性李斯特菌噬菌体裂解酶LysZ5结合结构域,构建具有能够裂解金黄色葡萄球菌及李斯特菌的多功能裂解酶。SDS-PAGE结果表明,融合结构域的重构酶蛋白Ply187KS-Z5大小约为58 kDa,其在金黄色葡萄球菌及李斯特菌平板表面能够形成透明裂解圈。分析对金黄色葡萄球菌及李斯特菌在生肉表面的裂解活性表明,嵌合酶蛋白Ply187-KS能够有效裂解金黄色葡萄球菌,作用1 h后菌落数降至2.16 log,而重构酶Ply187KS-Z5不仅裂解金黄色葡萄球菌并同时能够裂解李斯特菌,且重构酶针对金黄色葡萄球菌噬菌体的裂解活性与Ply187-KS裂解效果相当,从而表明裂解酶结合结构域重组将是获得高效广谱裂解酶的新途径。

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