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小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限

文献类型： 中文期刊

作者： 白月 1 ; 栾凤侠 1 ; 王珣 2 ;

作者机构： 1.黑龙江出入境检验检疫局

2.黑龙江省农业科学院生物技市研究所

关键词： 转基因小麦;PCR;实时荧光PCR;绝对检测低限;相对检测低限

期刊名称： 麦类作物学报

ISSN： 1009-1041

年卷期： 2009 年 29 卷 02 期

页码： 199-205

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和Wx012、GAG56 D内源基因的引物和探针对模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增。结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/μL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL。所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求。

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