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J亚群禽白血病病毒SUJ及兔IgGFc基因在腺病毒表达系统中的融合表达

文献类型: 中文期刊

作者: 梅梅 1 ; 钱科 2 ; 唐应华 1 ; 秦爱建 3 ; 侯继波 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院

2.江苏省出入境检验检疫局

3.扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室

关键词: J亚群禽白血病病毒;gp85基因;兔IgGFc;腺病毒;融合表达

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2016 年 32 卷 04 期

页码: 848-853

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为获得J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜蛋白gp85和兔IgGFc的融合蛋白,通过腺病毒表达系统融合表达ALV-J SUJ和兔IgGFc(r IgGFc)基因。将pc DNA3.1-SUJ-r IgGFc用XhoⅠ、KpnⅠ进行双酶切,获得SUJ-r IgGFc基因,将其克隆至p Shuttle-CMV质粒,构建穿梭载体p Shuttle-CMV-SUJ-r IgGFc,重组质粒转化含p Adeasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞,获得重组腺病毒质粒p Ad-SUJ-r IgGFc,最后转染人293T细胞。表达的融合蛋白可被ALV-J单克隆抗体JE9以及羊抗兔IgG识别,重组蛋白的分子量大小约9.5×104,且与JE9及羊抗兔IgG都有很好的反应性;免疫共沉淀试验结果显示融合蛋白可与DF1细胞膜蛋白混合物反应并获得差异蛋白。该融合蛋白可与ALV-J宿主细胞蛋白发生特异性反应。

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