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奶牛乳房炎致病菌多重Taq-Man荧光PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张莉莉 1 ; 丁慧妍 1 ; 魏瑞成 1 ; 庞茂达 1 ; 何涛 1 ; 包红朵 1 ; 王冉 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院

关键词： 奶牛乳房炎;Taq-Man荧光PCR;大肠杆菌;金黄色葡萄球菌;无乳链球菌

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN：

年卷期： 2020 年 011 期

页码： 90-94

收录情况： 北大核心

摘要： 为同时检测大肠杆菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌,提高对奶牛乳房炎的诊断率,本试验针对3种病原菌的保守序列设计合成了3套特异性引物,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了多重Taq-Man荧光定量PCR检测方法.结果显示,该检测方法具有高特异性,与肠炎沙门菌、肺炎克雷伯菌及鲍曼不动杆菌等无交叉反应;大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的最低检测浓度分别为103 、102和104 拷贝数/μL,敏感度较高.DNA各个拷贝数浓度的变异系数均低于2.02%,表明重复性良好.对24份临床采集奶样的检测结果表明,建立的多重Taq-Man荧光定量PCR检测方法可用于临床大肠杆菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌感染引起的奶牛乳房炎的检测,具有良好的推广应用价值.

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