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应用多重SYBR Green-I实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高梁花叶病毒

文献类型： 中文期刊

作者： 王洪星 1 ; 张雨良 2 ; 王健华 2 ; 章绍延 1 ; 熊国如 2 ; 刘志昕 2 ;

作者机构： 1.海南大学环境与植物保护学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 甘蔗黄叶病毒;高梁花叶病毒;SYBR;Green-I实时荧光PCR;病毒检测

期刊名称： 热带农业科学

ISSN： 1009-2196

年卷期： 2012 年 32 卷 007 期

页码： 52-56,62

摘要： 基于已报道的甘蔗黄叶病毒(SugarcaneYellowLeafVirus.SCYLV)cp基因和高粱花叶病毒(Sorghummosaicvirus.SrMV)NSP基因序列设计特异性引物.建立了针对这两种病毒的实时荧光定量PCR(re矗time-quantitative,RT-qPCR)检测方法.在此基础上,利用扩增产物‰值的不同,建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBRGreen-I实时荧光定量PCR方法.两种病毒扩增产物的‰值分别为80.8~82.8℃和84.6~86.6℃.检测数据显示:SrMV和ScYLV均有各自的特异性峰值出现,而健康植株无特异性峰值;在单独检测中的检出水平分别可达500和250copy/ixL:两种病毒m值的批内变异系数分别为0.03%和0.0270.批间变异系数分别为2.0670和3.1270.综上所述.所建立的多重SYBRGreen-I实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性.

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