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高密度发酵P.pastoris组成型表达纤维素二糖水解酶

文献类型： 中文期刊

作者： 崔艳艳 1 ; 易国辉 1 ; 屠发志 1 ; 张添元 2 ; 罗进贤 2 ; 张爱联 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.中山大学基因工程教育部重点实验室/生物化学系

关键词： 纤维素二糖水解酶;毕赤酵母;基因表达;纤维素酶活力

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2010 年 31 卷 08 期

页码： 64-68

收录情况： CSCD

摘要： 用PCR法扩增里氏木霉cbhⅡ基因,并将其克隆到P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP9K-cbhⅡ。通过电转法将cbhⅡ基因整合到P.pastoris的基因组中,然后筛选高G418抗性的克隆作为工程菌菌种。在生物反应器中生产CBHⅡ,将20L发酵液装入50L的发酵罐中,在发酵过程中连续64h补加甘油-PTM4,放罐时生物量为A600=170,CBHⅡ的表达量为75mg/L。其表达产物具有酶解羧甲基纤维素的活性。

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