文献类型： 中文期刊

作者： 吴金青 ¹ ; 梅瑰 ² ; 刘志国 ³ ; 陈瑶生 ⁴ ; 丛佩清 ² ;

作者机构： 1.中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室

2.中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室

3.中山大学生命科学学院/有害生物控制与资源利用国家重点实验室

4.中山大学生命科学学院

关键词： IGF2基因;ZFN;CRISPR/Cas9;SSA报告系统

期刊名称： 遗传

ISSN： 0253-9772

年卷期： 2015 年 37 卷 01 期

页码： 55-62

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义。文章在蓝塘猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblasts,PEF)中检测了锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率,结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达9.2%,显著高于ZFN的切割效率(<1%),但两者均未达到作为体细胞核移植(Somatic nuclear transfer,SCNT)供体细胞所需的打靶效率。应用SSA(Single-strand annealing)报告载体筛选技术来富集IGF2基因被ZFN和CRISPR/Cas9修饰过的PEF细胞,结果表明,该技术可使CRISPR/Cas9的打靶效率提高5倍左右,对ZFN的打靶效率具有更大的增强作用。